批准登记号：9512019J0927

推荐单位：四川省教育厅

批准登记日期：2019-12-27

研究起始日期：2016-12

研究终止日期：2019-12

成果密级：非密

成果水平：国内先进

关键词：造影剂，急性肾损伤，炎症，凋亡，TLR4

成果体现形式：论文

合作形式：独立研究

学科分类号：320.24

中图分类号：R5

战略性新兴产业：

社会经济目标：卫生事业发展

成果应用行业：卫生和社会工作

成果简介：随着临床上CT增强检查及介入技术的发展，造影剂引起的肾脏损伤已经成为医源性急性肾损伤的主要原因之一。造影剂肾病主要的发病机制是肾脏的缺血缺氧、造影剂的直接毒性作用、氧化应激等等，而明确的发病机制目前尚未完全阐明。随着免疫炎症反应在AKI中的机制研究愈加深入，我们在前期研究中， 通过体内外造影剂肾病的模型发现，TLR4/NF-κB信号通路及其下游的炎症因子表达的上调。因此我们提出以下科学假说：造影剂可通过TLR4/MyD88/NF-κB经典的信号通路激活免疫炎症反应，从而参与肾脏的损伤，从而导致肾小管上皮细胞的损伤和凋亡。本项目通过体内外实验相结合，从组织、蛋白、基因层面上，来探讨了肾小管上皮细胞TLR4/MyD88/NF-κB及其下游炎症因子在造影剂肾病中的作用机制，为临床救治提供新的理论及实验依据。

成果公报内容： 随着医学发展，含碘的非离子造影剂已广泛运用，为疾病的诊断、治疗提供了更方便、快捷、经济及准确的作用。本研究证实造影剂可引发机体的炎症反应及肾小管上皮细胞的凋亡，最终导致肾功能的急性损伤。故可引起临床医生对造影剂肾病的重视，尽可能的避免高危患者因造影剂的使用而出现肾损伤，针对必须使用造影剂以协助临床诊治的患者，则可早期发现肾功能的减退及避免肾功能的进一步恶化。预防、早期诊断及治疗造影剂肾病可降低患者的医疗费用，节约医疗资源，提高医疗质量及人民健康指数。 本项目通过体外培养HK-2细胞及体内对C57小鼠给药构建了造影剂肾病的模型，再通过使用siRNA对TLR4和NF-κB进行基因沉默和分别使用TAK-242和PDTC对TLR4和NF-κB靶点进行了阻断，证明了TLR4/MyD88/NF-κB信号通路参与了造影剂肾病的发生。同时，通过ELISA法和RT-qPCR的方法检测了炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的释放。证实了，阻断TLR4/MyD88/NF-κB信号通路可以缓解由造影剂诱导的炎症释放，为炎症反应参与了造影剂肾病的发生进一步提供了证据支持，同时为通过预防炎症反应来预防或者治疗造影剂肾病提供了理论依据。 不仅炎症参与了造影剂肾病的发生，细胞凋亡也是其主要原因之一。本项目通过使用流式细胞学技术检测各组间早期及晚期细胞凋亡情况，以及检测凋亡相关蛋白caspase3、caspase9的表达，证实了TLR4/MyD88/NF-κB信号通路也参与了造影剂肾病所致的肾小管上皮细胞凋亡。为细胞凋亡参与了造影剂肾病的发病机制提供了证据支撑，也为通过抗凋亡的方式来预防或者治疗造影剂肾病奠定了理论基础。